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气相色谱-质谱联用分析茵陈与牛至挥发油的化学成分_药学论文

2022-01-29

知识百科】导语,大家所欣赏的此篇文章共有15988文字,由韩佩成精心更正,发表于范万文网!范万文小百科:茵陈蒿(学名:Artemisia capillaris Thunb.)是菊科,蒿属半灌木状草本植物,植株有浓烈的香气。主根明显木质,茎单生或少数,高可达120厘米,红褐色或褐色,基生叶密集着生,常成莲座状;叶片卵圆形或卵状椭圆形,二(至三)回羽状全裂,每侧有裂片,小裂片狭线形或狭线状披针形,通常细直,头状花序卵球形,有短梗及线形的小苞叶,总苞片草质,卵形或椭圆形,背面淡黄色,有绿色中肋,花序托小,凸起;花柱细长,伸出花冠外,花冠管状,花药线形,长三角形,瘦果长圆形或长卵形。7-10月开花结果。气相色谱-质谱联用分析茵陈与牛至挥发油的化学成分_药学论文要是你对这类文章有什么独特的建议,也可以上传分享给大家!

气相色谱-质谱联用分析茵陈与牛至挥发油的化学成分_药学论文 第一篇

   作者:霍务贞,卫世杰,袁旭江,索绪斌,李苑新,吴燕红,朱盛山

【摘要】  目的茵陈和牛至中挥发油成分,并比较其异同。方法 按20xx年版《中国药典》附录[挥发油测定法]中的规定,提取茵陈和牛至中的挥发油,用气相色谱-质谱法检测。 结果 茵陈和牛至挥发油的主要成分均为单萜类、双环倍半萜类成分。该两类成分在茵陈挥发油中质量分数分别为31.31%、68.69%;在牛至挥发油中质量分数分别为69.31%、20.25%。其中单萜类成分中两者共有成分的含量分别为17.89%、44.46%;双环倍半萜类成分中两者共有成分的含量分别为21.07%、14.0%。结论 茵陈和牛至的挥发油中含有一些相同成分,但含量有较大差异。

【关键词】  茵陈;牛至;挥发油;气相色谱-质谱;单萜类成分;双环倍半萜类成分

abstract:objectiveto yze the constituents in volatile oil from herba artemisiae capillariae and origanum vulgare l..methods volatile oil was extracted according to the chinese pharmacopoeia appendix and yzed by gc-ms.results most of the compounds isolated and identified from two herbs were monoterpenoids and bicyclic sesquiterpenoids:respectively 31.31% and 68.69% in herba artemisiae capillariae,69.31% and 20.25% in origanum vulgare l..the contents of mutual monoterpenoids were 17.89%,44.46%,and the contents of bicyclic sesquiterpenoids in common were 21.07%,14.0% respectively.conclusion some main compounds exist in the volatile oil of both herba a.capillariae and origanum vulgare l.,which varied in quantitis.

key words:herba artemisiae capillariae; origanum vulgare l.; volatile oil; gc-ms; monoterpenoids; bicyclic sesquiterpenoids

茵陈herba artemisiae capillariae 为菊科植物滨蒿artemisia scoparia waldst.et kit.或茵陈蒿artemisia capillaries thunb.的干燥地上部分,作为常用中药收载于20xx年版《中国药典》。wwW.0519news.cOM茵陈味苦、辛,性微寒,具有清利湿热、利胆退黄的作用[1]。牛至又名土茵陈,为唇形科植物牛至origanum vulgare l.是民间传统中药,具有清热解毒、理气化湿功效,主治中暑、感冒、急性肠炎等,尤其是对痢疾、肠炎引起的腹泻具有较好疗效[2]。牛至与茵陈均含有挥发油,而挥发油类化合物多具有祛痰、止咳、促进发汗、抗菌、开窍、扩张血管和抗癌等生物活性[3]。据研究报道,茵陈挥发油在试管内能抑制或杀灭引起皮肤病的某些真菌,对流感病毒、肝炎病毒均有抑制作用[4];牛至的主要成分是挥发油,对31种常见菌均有不同程度的杀菌和抑菌作用,其中对金黄色有萄球的抑菌作用最强[5]。虽然挥发油成分在茵陈与牛至中均为重要的有效成分,但关于茵陈中挥发油的利用未见进一步研究报道,近年来对牛至的应用也多见于动物药,人类用药的研究也未见报道。故本试验应用气相色谱-质谱联用技术对两者的挥发油成分进行比较,为其挥发油进一步开发利用提供实验依据。

 1仪器与试药

6890n/gc-5973/ms气质联用仪(agilent公司);茵陈、牛至药材均购自广州市药材公司(批号:20xx1209、20xx0316),经广东药学院朱盛山教授鉴定分别为菊科植物滨蒿artemisia scoparia waldst.et kit.的干燥地上部分和唇形科牛至属植物origanum vulgare l.的全草;实验试剂均为化学纯。

 2方法与结果

2.1气相色谱条件

色谱柱为hp-5色谱柱(50 m×0.25 mm×025 μm);载气为高纯he(99.999%);总流量为20.4 ml·min-1;分流比为1∶20.4;流量为1.0 ml·min-1;进样量为1 μl。升温程序:初温60 ℃以0.8 ℃·min-1升至80 ℃,再以1.2 ℃·min-1升至150 ℃。

2.2质谱条件

离子源为ei源;电子能量为70 ev;传输线温度为200 ℃;离子源温度为230 ℃;四极杆温度为150 ℃;质量扫描范围33~900 m/z。检索谱库为nist02.l.。

2.3供试液的制备

按《中国药典》20xx年版一部附录ⅹd[挥发油测定法]项下甲法操作[1]提取挥发油。提取液冷却后,分取提取管中挥发油。精密吸取挥发油0.1 ml置2 ml容量瓶中,加入乙酸乙酯定容,加无水na2so4脱水过夜,0.22 μm微孔滤膜滤过,滤液备用。

2.4挥发油成分的gc-ms

按“2.1”、“2.2”项下条件,分别对茵陈、牛至挥发油进行测试,供试品的总离子流色谱图见图1、2。经计算机标准质谱库检索,茵陈挥发油鉴定出49个色谱峰,其中峰面积占总出峰面积相对含量大于1%的成分有24种,占总出峰面积的86.99%;牛至挥发油中鉴定出45个色谱峰,其中峰面积占总出峰面积相对含量大于1%的成分有13种,占总出峰面积的83.47%,见表1。[psa6241;s7/8〗图1茵陈挥发油成分总离子流图

 3与讨论

由表1可见,茵陈和牛至挥发油成分均主要为单萜类和双环倍半萜类成分:茵陈挥发油中24个主要成分占总出峰面积86.99%,其中6个单萜类成分出峰面积占主成分峰面积百分含量的31.31%;18个双环倍半萜类成分出峰面积占主成分峰面积百分含量的68.69%。牛至挥发油13个主要成分占总出峰面积90.92%,其中7个单萜类成分出峰面积占主成分峰面积百分含量的69.31%,6个双环倍半萜类成分出峰面积占主成分峰面积百分含量的20.25%。

茵陈和牛至挥发油单萜类成分中有6个相同成分:1-甲基-4-[1-甲基乙基]苯、甲基水杨酸、2-甲氧基-4-甲基-1-[1-甲基乙基]-苯、1-甲氧基-4-甲基-2-[1-甲基乙基]苯、百里香酚和香荆芥酚。这6种相同成分占茵陈挥发油中总出峰面积的27.24%,在牛至挥发油中占总出峰面积的61.87%。其中香荆芥酚、百里香酚是2种药材挥发油单萜类成分中出峰面积最高的,两者总量在茵陈中为17.89%,在牛至中高达4446%。

茵陈和牛至挥发油双环倍半萜类中有3种相同成分:石竹烯、匙叶桉油烯醇、石竹素,3种成分在2种挥发油中质量分数分别为21.07%、14.0%。由本试验可知,2种药材挥发油中相同成分种类较多,但在挥发油中含量不同,其在组方、单方中对不同菌种的抑制作用有待进一步研究。

【参考文献】

[1] 国家药典委员会.中华共和国药典:20xx年版一部[m].:中国医药科技出版社,20xx:223,附录63.

[2] 中国科学院植物所.中国高等植物图鉴:第三册[m].:科学出版社,1974:68.

[3] 中国药科大学.中药辞海:第二卷[m].:中国医药科技出版社,1996:1262.

[4] 魏建华,刘学敏.茵陈的现代药理研究[j].基层医学,20xx,13(8):744.

[5] 朱斌,程向炜,刘迎新,等.牛至油化学成成分、药理活性及提取方法研究进展[j].中药材,20xx,30(8):1038-1040.

双柏凝胶剂中大黄素体外透皮吸收的实验研究_药学论文 第二篇

           作者:梁学政,奉建芳,陈惠红,吴昭璇

【摘要】  目的研究双柏凝胶剂中主要成分大黄素的透皮吸收特性,并考察了处方中其他成分对大黄素吸收的影响作用。方法采用改良的franz扩散装置,以离体鼠皮为屏障、ph7.4磷酸盐缓冲液为接受介质,研究了大黄提取物凝胶及双柏凝胶剂中大黄素透皮吸收性能。结果在大黄提取物和双柏凝胶剂中,大黄素12 h累积透皮释药为10.03,37.06 μg·cm-1。结论大黄提取物凝胶中大黄素具有一定的透皮吸收,但不太理想,而双柏凝胶剂由于其他组分的加入,促进了大黄素的吸收,从一个方面佐证了该处方制成凝胶剂的可行性。

【关键词】  双柏凝胶剂; 大黄素; 透皮吸收

   双柏散由大黄、黄柏、泽兰、侧柏叶、薄荷组成,具有消肿止痛,活血化瘀之功效,主要用于治疗跌打损伤早期及疮疡初起红肿热痛等症[1]。传统的蜜调散剂使用时易污染衣物,且存在较多的过敏反应。为方便使用,同时为提高药物的生物利用度,我们将其制成双柏凝胶剂。本文以大黄提取物凝胶作对比,以大黄素为指标,考察了双柏凝胶剂透皮吸收情况,从而对双柏凝胶剂的体外吸收进行初步评价。wWw.0519news.COm

1  仪器与试药

1.1  仪器高效液相色谱仪(日本岛津):lc-10atvp双泵,slc-10avp控制器,spd-10avp紫外检测器,cto-10asvp柱温箱。

1.2  试药大黄素对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号为0756-9908);甲醇为色谱纯;大黄、黄柏、泽兰、侧柏叶、薄荷由柳州市神农中药饮片厂提供,经柳州市中医院药检室鉴定,符合《中国药典》要求;其余试剂均为纯。

2  方法与结果

2.1  凝胶剂的制备取处方量的大黄(a)和根据双柏散处方比例称取药材粗粉(b),均加95%乙醇浸泡6 h,以5~7 ml/min的速度渗漉提取,相应渗漉液浓缩至约50 g,加入3 g 卡波姆940,密闭放置过夜使其充分溶胀,加蒸馏水至100 g,研匀即得。分装于密闭避光的容器中,贮存于凉处。a:大黄凝胶;b:双柏凝胶

2.2  建立测定方法

2.2.1  色谱条件

色谱柱为选kromasil- c18 柱(5μm,250 mm×4.6  mm);流动相为甲醇-水(6:4);流速1.0 ml/min;检测波长254 nm;柱温30℃;进样量:10 μl。

2.2.2  对照品溶液制备

精密称取大黄素对照品5 mg,加甲醇溶解定容至25 ml,制成0.2 mg/ml的溶液,即可。

2.2.3  供试品溶液制备

精密称取凝胶剂1 g,水浴浓缩至近干,加蒸馏水10 ml,浓盐酸1 ml,沸水浴中水解30 min,再加氯仿20 ml,超声振荡20 min,置分液漏斗中分层,取氯仿层;水层用氯仿洗3次,每次10 ml,合并氯仿液,挥干。加适量甲醇溶解,转移至10 ml容量瓶中,超声振荡数分钟使溶解完全,加甲醇至刻度,摇匀。针孔式微孔滤膜过滤,弃去初滤液,取续滤液作为供试品溶液。

2.2.4  线性关系

考察精密吸取对照品溶液用流动相稀释成0.4,1.0,2.0,4.0,10.0 μg·ml-1进样10 μl测定,以大黄素进样量(y)和峰面积(x)进行线性回归,求得标准曲线的回归方程为:y=3 300.3x-1 422,r=0.999 8。结果表明大黄素进样量在0.4~10 μg·ml-1范围内有良好的线性关系。

2.2.5  精密度实验

精密吸取上述对照品溶液10 μl,重复进样测定5次,结果大黄素峰面积值的rsd=0.59%,表明仪器精密度良好。

2.2.6  稳定性实验

取供试品溶液,于0,1,2,3 h分别进样测定峰面积,结果rsd=0.42%。表明供试品在3 h内稳定。

2.3  体外透皮吸收方法

2.3.1  离体鼠皮的制备

取体质量20~22 g小鼠 ,乙醚麻醉,剪去背部毛,取皮肤剥离皮下脂肪及粘液组织,用生理盐水冲洗干净,备用。

2.3.2  接受液ph 7.4的磷酸盐缓冲液。

2.3.3  体外透皮实验装置及方法

本实验采用 franz扩散池装置。将备用鼠皮固定在扩散池的供应室与接受室之间,使角质层面向供应室,上下夹紧后在接受室中注满接受液,驱除气泡。在供应室中分别加入1 g样品凝胶(a )及( b)。开启电磁搅拌器连续搅拌,并保持水浴温度在( 32 ±0. 5 )℃。分别在 0.5,1,2,4,6,8,12 h取样4 ml,同时补加等量同温的新鲜接受液。

2.3.4  接受液含量测定

和累积透皮量的计算取接受液4 ml供试品溶液制备项下操作得到供试品溶液。取10 μl进样,在 254 nm处测得峰面积,代入标准曲线方程,得接受液浓度,并按以下公式计算累积释药量

(q):c1=f(xi);q=(ci×v∑n-1i=1+ci×4)/s。其中 f(xi):标准曲线方程;ci:接受液中药物浓度 ;v:接受液体积 ;s :扩散面积。

2.4  体外透皮吸收结果色谱分离结果见图1。

结果以累积透皮释药量q对释药时间t作图 (见图2)。将数据进行模型拟合,渗透动力学符合higuchi函数方程,即a凝胶:q=2.751t1/2+0.704(r=0.995 3),渗透速率为2.386 μg·h-1,而b凝胶:q=7.615t1/2+10.542(r=0.986 7),渗透速率为7.619 μg·h-1。

经处方配伍后,大黄中主要成分大黄素的经皮渗透效果优于其单一药物大黄制成的凝胶剂。

3  讨论

实验全部选择雄性昆明小鼠可便于取皮操作及结果数据的平行。同时以高效液相色谱法为离体鼠建立了可靠的体外测定方法,在渗透实验中,由于皮肤与介质长时间接触,皮肤中蛋白质等物质易脱落,溶解,会导致混浊或呈乳光,本文酸化样液以游离出脂溶性大黄素,然后氯仿提取,从而消除了皮肤中蛋白等成分对色谱柱的影响。

体外透皮实验中水浴设定的温度为(32±0.5)℃系最接近正常人体表皮的温度。实验中的接受液ph设定在7.4也是因其接近人体皮肤的ph值。

本实验中结果显示,由于处方中含有泽兰、侧柏叶、薄荷等其他成分,使双柏凝胶剂中大黄素的渗透作用提高,从此角度可以看出双柏凝胶剂用于局部具有一定透皮作用。但究竟是处方中的何种成分提高了大黄素的透皮吸收,由于时间及经费等方面的原因还有待于进一步的研究。

【参考文献】

[1]岑泽波,吴诚德.中医伤科学[m].上海:上海科学技术出版社,1985:243.

轮叶党参对鼠的抗疲劳作用的实验研究_药学论文 第三篇

【摘要】  目的观察轮叶党参酒精提取液的抗疲劳作用。方法将28只健康的wistar大鼠随机分成4组,每组7只,即对照组,轮叶党参高浓度组、中浓度组 、低浓度组;取40只昆明小鼠经测定游泳基础时间后,筛选出28只随机分成4组,每组7只,即对照组,轮叶党参高浓度组、中浓度组、低浓度组;分别灌胃2周后,利用rm-6240系统电大鼠坐骨神经对在体比目鱼肌收缩力学指标的影响;测定大鼠比目鱼肌的sod和mda值;观察小鼠负重游泳时间。结果轮叶党参使大鼠比目鱼肌单收缩的潜伏期缩短、最大收缩幅度增强、1/2舒张时间延长,使强直收缩的潜伏期缩短、最大收缩幅度、疲劳指数增强,使大鼠比目鱼肌的sod活性增强、mda值下降,使小鼠负重游泳时间延长。结论轮叶党参酒精提取液具有抗疲劳作用。

【关键词】  党参属; 比目鱼肌; 骨骼肌力学; 自由基

     轮叶党参又名山海螺、四叶参、羊乳、羊奶、羊奶参、白莽肉、山胡萝卜等,系桔梗科多年生草本质缠绕藤本,有白色乳汁。以“羊乳”之名始载于《名医别录》,是长白山区珍贵的山野菜和中药材,含有丰富的维生素、氨基酸及铁、锌、钛等元素。现代药理学研究表明,轮叶党参具有降血脂、抗氧化、抗突变、抗肿瘤及提高机体免疫力的作用[1~4]。骨骼肌作为人体运动的动力器官,收缩能力的高低是影响人体运动能力的重要因素。www.0519news.Com如何提高骨骼肌收缩能力以及探讨长时间运动时骨骼肌疲劳机制是运动生理的研究热点之一。中药对骨骼肌抗疲劳的研究非常广泛,目前对骨骼肌收缩力学的报道较少。本实验观察了轮叶党参酒精提取液对大鼠在体骨骼肌的收缩力的指标和生化指标sod和mda值及小鼠负重游泳时间的影响。

 1  材料与仪器

1.1  轮叶党参50%酒精提取液由延边大学基础医学院卫生毒理学教研室提供,每毫升含1 g生药,临用前加入生理盐水配制成10 g/l稀释液。

1.2  动物体质量为180~200 g的wistar系雄性大鼠28只和体质量为18~20 g的雄性昆明种小鼠40只,均由延边大学医学部实验动物科提供。

1.3  仪器及试剂rm-6240多道生理采集处理系统及jzj101压力换能器(50 g),由成都泰盟科技有限公司生产。sod测试盒、mda测试盒由南京建成生物工程研究所生产。

2  方法

2.1  大鼠骨骼肌收缩力影响将28只大鼠随机分为轮叶党参高、中、低浓度组及对照组,每组各为7只,分别灌胃。各给药组给予相应剂量(960,480,240 mg/kg)轮叶党参,对照组给予等容量生理盐水灌胃,1次/d,连续14 d。末次给药30 min后,腹腔注射100 g/l水合氯醛(300mg/kg)进行麻醉,大鼠采用腹卧位固定,制作两侧的坐骨神经-比目鱼肌标本,标本通过张力换能器与rm6240系统连接。从0.1 v开始(延时20 ms,波宽2    ms),寻找阈强度后逐渐增加强度直至引起单收缩最大收缩幅度的最小强度,在2倍单强度条件下观察肌肉单收缩的潜伏期(ct)、收缩幅度(pt)及最大舒张1/2时间(hrt); 在适当频率下神经,观察骨骼肌完全性强直收缩的潜伏期(ct)、收缩幅度(pt)及疲劳指数(fi)。

2.2  大鼠比目鱼肌sod和mda值测定骨骼肌收缩力测定结束后,小心地取出对侧未测定的比目鱼肌,立刻放入液氮中速冻(-80℃),严格按照试剂盒说明书执行sod、mda的测定。

2.3  小鼠负重游泳时间的影响首先对40只小鼠进行游泳训练,共2次,30 min/次,间隔3 d。在小鼠尾部1/3~2/3处负重(体重的5%)测量游泳时间,间隔3 d,共3次。选择游泳时间标准差<10 min的28只小鼠,随机分为轮叶党参高、中、低浓度组及对照组,每组各为7只分别灌胃,给予各给药组小鼠相应剂量(2.0,1.0,0.5 g/kg)的轮叶党参 ,给予对照组小鼠等容量生理盐水,1次/d,连续14 d。于第14天末次给药灌胃30 min后,在小鼠尾部1/3~2/3处负重(体质量的10%),放入水深为22 cm,水温为28℃的水槽中游泳,观察和记录每只小鼠沉入水下10 s不能浮出水面的时间;同时观察给药前、后小鼠体质量的变化情况。

2.4  统计学处理实验数据以±s表示,采用pri 3.0统计软件进行单因素方差。

 3  结果

3.1  轮叶党参对大鼠比目鱼肌收缩力的影响轮叶党参高、中、低浓度组大鼠比目鱼肌单收缩的潜伏期明显缩短,最大收缩幅度明显增加,高浓度组大鼠1/2 舒张时间明显延长,与对照组比较均有显著性差异(p<0.05,p<0.01);明显缩短强直收缩的潜伏期,增加最大收缩幅度及疲劳指数,与对照组比较均有显著性差异(p<0.05或p<0.01)。见表1。表1  轮叶党参对大鼠比目鱼肌收缩力的影响(略)

3.2  轮叶党参对大鼠比目鱼肌生化指标的影响大鼠mda含量减少,高浓度组与对照组比较有显著性差异(p<0.01) ;大鼠比目鱼肌sod含量均增加,高浓度组与对照组比较有显著性差异(p<0.05),有统计学意义。 见表2。表2  轮叶党参对大鼠比目鱼肌生化指标的影响结果(略)

3.3  轮叶党参对小鼠负重游泳时间的影响轮叶党参高浓度组小鼠体重在灌胃1周和灌胃2周后分别与对照组的比较(p<0.05,p<0.001)有统计学意义,而且轮叶党参高浓度组和中浓度组的游泳时间也比对照组明显增加(p<0.01,0.001),具有显著性差异 。

表3  轮叶党参提取液对小鼠负重游泳实验结果(略)

4  讨论

本研究结果表明,轮叶党参具有缩短大鼠骨骼肌收缩的潜伏期,增强骨骼肌的收缩力,延缓hrt及提高疲劳指数的作用,高及中浓度的轮叶党参可明显延长小鼠的负重游泳时间,提示轮叶党参酒精提取液的有效成分具有抗疲劳作用。

在生物体内,许多生物化学反应都产生内源性活性氧自由基。在正常条件下,机体的抗氧防御体系使自由基的产生和清除保持严格的动态平衡。但在力竭性运动中,机体耗氧增加,氧自由基生成增加,脂质过氧化加强,在脂质过氧化过程中可以产生大量的自由基和一系列自由基链式反应,它们可以攻击细胞膜和细胞内的酶,导致蛋白质变性,酶失活[5,6]。天然抗氧化剂能够清除或抑制自由基的产生,阻断自由基链式反应启动和蔓延,从而预防和减轻自由基对机体的损伤[7,8]。

轮叶党参是常用的补中益气药。 在轮叶党参对大鼠sod活力影响实验中发现[9], 轮叶党参提取液可使它们的sod活性明显高于对照组,mda含量测定结果表明,摄入轮叶党参的动物不仅sod酶活性单位值增高,而且机体内脂质过氧化物的产生量也明显降低,说明摄入轮叶党参不仅增强了对自由基的清除,而且能够减少机体内自由基的发生。本实验生化结果亦表明高浓度组与对照组相比mda含量减少,sod活性增高,有统计学意义。说明轮叶党参酒精提取液的有效成分可显著提高大鼠骨骼肌中超氧化物歧化酶(sod)活性,降低脂质过氧化产物丙二醛(mda)含量,增强机体清除自由基的能力,减少机体内自由基的产生,延缓疲劳的出现,从而抑制机体衰老作用,但其机制尚不明确,有待于进一步的深入研究。

【参考文献】

1]徐惠波.轮叶党参多糖对单核-巨噬细胞系统吞噬功能的影响[j].吉林医药工业,1988,3:20.

[2]韩春姬,韩龙哲,李莲姬,等.轮叶党参总皂苷抗突变作用的实验研究[j].环境与职业医学,20xx,21(5):397.

[3]韩春姬,李铉万,李莲姬,等.轮叶党参多糖多小鼠s180肉瘤的抑制作用[j].延边大学医学学报,2000,23(4):245.

[4]李 克,王冬明,韩春姬,等.轮叶党参对高血脂大鼠体内铜、锌的调节作用[j].中国公共卫生,20xx,21(3):339.

[5]田 野,王义润,杨锡让,等.力竭运动对脂质过氧化和atp代谢的影响[j].中国运动医学杂志,1994,13(2):109.

[6]魏 源.运动性疲劳研究进展的综述[j].韩山师范学院学报,2000,21(2):80.

[7]jenkins rr.the relationship of oxygen uptake of superoxide dissuade and catalase activity in human skeletal muscle[j].int j sports med,1984,5(1),11.

[8]郑少勤,梅 参.运动饮料对小鼠及竞走运动员抗疲劳作用的研究[j].中国运动医学杂志,1995,14(1):12.

[9]朴奎善,韩春姬,申英爱,等.轮叶党参对大鼠sod活力和mda含量的影响[j].中国中医药科技,1998,5(4):239.

基于FTIR的鸡骨草药材化学成分整体分析与评价_药学论文 第四篇

          作者:孔德鑫,黄荣韶,王一兵,陈植成,黄庶识

【摘要】  目的研究鸡骨草的红外光谱特征及其不同部位化学成分的差异。方法采集鸡骨草和毛鸡骨草药材整株和观察其不同部位的傅里叶变换红外光谱(ftir)图,运用二阶导数谱和半定量研究不同谱图间的差异。结果①鸡骨草含挥发油、三萜类、氨基酸、黄酮、皂苷、多糖类等化学成分。②鸡骨草不同部位红外“指纹”区的特征光谱显示:鸡骨草根部的黄酮类少于茎部,而皂苷类和多糖类成分较高于茎部。结论红外光谱技术可以快速鉴别出鸡骨草的化学成分,从整体上评价药材质量的优劣,为规范化种植鸡骨草药材提供了一种检测方法。

【关键词】  红外光谱; 鸡骨草; 化学成分; 黄酮; 皂苷; 多糖

 chinaabstract:objectiveto investigate the spectral characteristic and the difference of constituents of different parts of abrus cantoniensis.methodsthe ftir was utilized to investigate the different parts of abrus cantoniensis, the secondary derivative spectra and  semi-quantitative ysis were used to ysis difference constituents of different parts of abrus cantoniensis,. results(1) the volatile oil, triterpenes, amino acid, flavonoids, saponin, polysaccharides were contained in a. cantoniensi; (2) it was indicated that characteristic spectra of ir fingerprint region of different parts in a.cantoniensis: flavonoids of stem were higher than root, but saponin and polysaccharides of root were all higher than stem in a. cantoniensis. conclusionthe chemical component differences can be identified fastly between different parts of a. cantoniensis using ftir spectroscopy, the quality chinese medicinal materias can be integral evaluted,which provides a useful method for the standardized planting of the materials of a.cantoniensis.

key words: infrared spectrum;   a. cantoniensis;   chemical constituents;   flavonoids;   saponin;   polysaccharide

鸡骨草abrus cantoniensis hance,又名广州相思子、细叶鸡骨草、小叶鸡骨草,为豆科相思子属植物[1],原产广西、广东等南部省区,以广西的栽培面积最大,是广西的道地药材,其植株含相思子碱、皂苷、黄酮苷、胆碱、甾醇类、氨基酸、糖类化合物等化学成分[2],药用部位为去除荚果后的干燥全草,具有清热解毒、疏肝止痛之功效,用于治疗黄疸、胁肋不舒、胃脘胀痛、急慢性肝炎等疾病 [3]。WWw.0519news.com目前,研究鸡骨草的化学成分主要采用紫外分光光度法、反相高效液相色谱法等 [4~7],这些方法前处理过程复杂、耗资多,很难直接应用于鸡骨草药材质量的快速评价。红外光谱技术是利用分子振动跃迁吸收原理,具有取样量少、制样简单、不需对样品进行提取分离等特点,在“指纹”区能快速区别不同的中药材,它可以对中药材全组分进行直接测定,反映制剂整体信息 [8~10]。本研究运用傅里叶变换红外光谱(ftir)技术,结合二阶导数及半定量法研究鸡骨草的红外指纹特征及其不同部位在红外“指纹”区化学成分之间的光谱差异,为建立直接、快速和准确测定鸡骨草有效成分的试验方法,科学评价药材质量提供参考。

 1  仪器与材料

1.1  仪器傅里叶红外光谱仪(nicolet 5700,dtgs/b检测器)。

1.2  样品来源鸡骨草药材于20xx-10采自在广西大学农学院教学科研基地(20xx年种植),经广西大学农学院黄荣韶教授鉴定为豆科相思子属植物鸡骨草a.cantoniensis。

 2  方法

2.1  样品制备样品在55℃干燥48 h,粉碎过200目,每个样品作3个重复,各样品称1.0 mg与溴化钾(碎晶)混合研磨充分均匀,压片成厚度约1 mm的锭片,将锭片放入红外光谱仪测定,每个片随机扫3个不同的点,再取其平均谱图作为最后的样品谱图。

2.2  测试条件光谱范围4 000~400 cm-1;光谱分辨率4 cm-1;扫描次数64次。

3  结果

3.1  鸡骨草全株红外光谱特征依据鸡骨草的化学成分特征,可以将鸡骨草的红外吸收光谱(图1~2)分为3个波段,第1波段:3 500~2 800 cm-1,中心位置在3 403.7 cm-1的宽带振动主要是-oh伸缩振动峰和氨基酸中n-h键伸缩振动的叠加,2 923 cm-1和2 858cm-1两个峰分别是-ch2的对称和反对称伸缩振动峰。此波段可以认为是挥发油类、蛋白质和核酸等物质对光谱的贡献[11];第2波段:1 800~1 240 cm-1,应归属为α,β-不饱和酯键、c=c或芳环骨架振动的叠加峰[12]。在1 735 cm-1是酯羰基的伸缩振动峰,1 639 cm-1是c=c或芳环骨架振动的叠加峰,1 375 cm-1和1 247 cm-1附近是三萜类骨架振动[13]。可见此波段主要是酯类、黄酮类和萜类物质的特征吸收。第3波段:1 200~1 000 cm-1,主要为糖苷或多糖类物质的特征吸收,1 153 cm-1附近为皂苷类的c-o基团的特征吸收。1 029 cm-1附近吸收峰最为强烈,是糖苷类物质的υc-o(h)伸缩振动 [12~14]。综上所述,鸡骨草主要含有挥发油、酯类、三萜类、氨基酸、黄酮、皂苷、多糖类化学成分,这跟前人研究结果一致[2]。

3.2  鸡骨草不同部位红外光谱比较图3~4是鸡骨草不同部位的一维和二阶导数红外谱图。因为收获时鸡骨草极易落叶,所以本文只作根和茎的比较。图3显示,在1 700~500 cm-1范围内根和茎的峰位和峰强无明显差别,以根的谱图为参照对象,计算出根和茎的红外谱的相关系数为0.991 4,表明鸡骨草根和茎中化学成分变化不大。二阶导数图谱的相关系数为0.9687。 但是从一维红外谱和二阶导数图谱上仍然可以看出鸡骨草根和茎存在的差异,例如:图3-1在1 241 cm-1处出现吸收峰,而在图3-2中此峰出现在1 261 cm-1处,相差20 个波数;图3-1在860,669 cm-1出现吸收峰,而在图3-2却没有出现;在1 760~1 710 cm-1区域内图4-1′ 只在1 754 cm-1附近有吸收峰,而图4-2′ 在1 757 cm-1和1 733 cm-1附近都有吸收峰;图4-1′在1 082 cm-1和1 069 cm-1有两个吸收峰,一强一弱,而图4-2′ 在此波段只出现单峰。由此表明鸡骨草不同部位化学成分组分可能存在差异。

3.3  鸡骨草不同部位化成分半定量试验中均取1 mg样品制片,分别测得鸡骨草根和茎在1 737,1 641,1 152,1 025 cm-1等处吸收峰的峰强,并计算出相应波数处的aroot/astem值列入表1中,可以推测出鸡骨草黄酮类根部<茎部,而皂苷和多糖类含量根部>茎部。表1  鸡骨草根茎红外吸收强度比较(略)

 4  结论

鸡骨草含挥发油、三萜类、氨基酸、黄酮、皂苷、多糖类等化学成分;鸡骨草根、茎中一些化学成分构成和含量上均存在差异,其中在含量上,黄酮类以茎部多于根部,皂苷和多糖类均以根部多于茎部;综合以上可以看出,运用ftir技术可以快速鉴别出鸡骨草所含有的化学成分以及其药材不同部位所含化学成分的差异,与一般方法相比具有无需要提取分离,并可以同时测定多种化学成分含量等优点,不破坏鸡骨草的原本性,可以从宏观上整体把握药材的质量。

【参考文献】

1]徐良,岑丽华,郑雪花,等.中药材鸡骨gap栽培研究[j].湖南中医杂志,20xx,21(3):109.

[2]郭巧生.药用植物栽培学[m].:高等教育出版社,20xx:41.

[3]中国药典委员会. 中国药典[s].:化学工业出版社, 20xx:135.

[4]胡 彦,罗永明,刘大强,等.鸡骨草与毛鸡骨草的形态学差异研究[j].时珍国医国药,20xx,19(3):618.

[5]黄荣韶,罗永明,胡 彦,等.毛鸡骨草总皂苷含量测定及其动态变化研究[j].广东农业科学,20xx,6):28.

[6]黄荣韶,玉永雄,胡 艳,等.鸡骨草总黄酮含量测定及其含量动态变化研究[j].中国中药杂志20xx,31(17):1428.

[7]尹桂华,杨美林,仲崇林,等.反相高效液相色谱法测定复方鸡骨草片中栀子苷的含量[j].中国药房,20xx,18(3):210.

[8]孙素琴,周 群,郁鉴源,等. 分子振动光谱法与中药研究的最新进展[j]. 光谱学与光谱,2000, 20(2): 199.

[9]刘红霞,孙素琴,杨峻山.现代红外光谱技术用于复方四逆汤的配伍研究[j].光谱学与光谱, 20xx, 27(7): 1316.

[10]赵花荣,王晓燕,陈冠华,等. 利用傅里叶变换红外光谱法鉴定小麦品种[j].光谱学与光谱, 20xx, 24 (11): 1338.

[11]谢晶曦,常俊标,王绪明.红外光谱在有机化学和药物化学中的应用[m].: 科学出版社, 20xx:403.

[12]刘智,李赛君,田洪波,等.三七不同部位成分的谱学性质研究[j].光谱学与光谱, 20xx, 25 (4): 579.

[13]周湘萍,刘 刚,时有明,等.普洱茶的傅里叶变换红外光谱鉴别研究[j].光谱学与光谱, 20xx,28(3): 594.

[14]周湘萍,刘 刚,时有明,等.普洱茶的傅里叶变化红外光谱鉴别研究[j].光谱学与光谱,20xx,28(3):594.

荷瘤大鼠肝动脉注射天冬胶毒副作用的实验研究_药学论文 第五篇

            作者:邢东炜,张闽光,刘力,唐岚

【摘要】  目的了解天冬胶对大鼠接种walker-256癌肉瘤经肝动脉灌注时对机体功能的影响。方法将sd大鼠分为生理盐水组、天冬胶组、天冬胶加5-fu组、5-fu组和碘油组,于肝接种walker-256瘤株10 d后分别经肝动脉灌注给药。给药结束2 d和7 d后分别处死各组部分大鼠,比较各组大鼠体重和血常规、肝肾功能变化。结果天冬胶组和天冬胶加5-fu组大鼠的体重变化最小;5-fu组wbc下降显著(p<0.05,0.01)。第2天时5-fu组与生理盐水组治疗后rbc和hgb下降显著(p<0.05)。治疗前各组大鼠肝肾功能无显著差异(p>0.05),治疗后5-fu组谷丙转氨酶(alt)、谷草转氨酶(ast)等指标有所增高;天冬胶加5-fu组的alt下降,与5-fu组比较有显著性差异(p<0.05),与其他组间比较无明显差异(p>0.05)。天冬胶加5-fu组在2 d时治疗前后的alt下降显著(p<0.01),碘油组在2 d时治疗前后的alkp 增长显著(p<0.05)。结论作为血管栓塞剂天冬胶可以降低化疗药对机体和正常肝组织的损害,兼有保肝作用,而碘油没有类似作用。www.0519news.COM

【关键词】  中药; 天冬胶; 动脉注射; 动物实验; 毒副作用

   肝癌是消化系统发生率最高的恶性肿瘤,经动脉化疗栓塞(trans-arterial chemotherapy and embolization, tace)的方法,已广泛应用于治疗不能切除的肝癌,但tace 对肝脏的损害也不容忽视。中药天冬具有独特的功效价值,本实验比较了作为血管栓塞剂的天冬胶及含化疗药天冬胶混合液与化疗药、碘油对大鼠肝脏种植walker-256癌肉瘤动脉灌注时其对机体及肝肾功能的影响作用。

 1  材料

肝脏移植瘤模型制作,以荷walker-256癌肉瘤腹水型sd大鼠(上海医工院研究所提供)为种鼠进行腹水传代。在本实验前5~6 d将肿瘤腹水接种于大鼠腋下形成实体瘤。再取实体瘤切割成大小约1 mm×1 mm×1 mm,植入体重约200 g清洁级雄性sd大鼠(购于上海实验动物中心)的肝脏。

2  方法

2.1  动物模型处理肿瘤移植后第10天,将大鼠随机分为5组,每组10只,分别剖腹,肝动脉穿刺注入加适量泛影葡胺溶胀的自制天冬胶(天冬胶组),天冬胶加5-fu (天冬胶加5-fu组);5-fu(5-fu组);碘化油(碘油组),生理盐水(盐水组),各组药物剂量约0.5 ml/kg。剔除不到分组时间的死亡大鼠,各组于给药后第2天、第7天分别处死5只大鼠。在治疗前和处死前分别取血3 ml,检测血常规和肝肾功能。

2.2  观察指标

2.2.1  大鼠体质量及一般情况观察各组给药前及处死前分别称重一次,观察各组大鼠的体重变化及大鼠的精神状态、活动情况、毛色等。

2.2.2  大鼠治疗前后血常规及肝肾功能各组大鼠治疗前及处死前检测血常规及肝肾功能各项指标。alt,ast,tbil,alkp,肌酐,尿素氮等测定均采用美国abbott aeroset全自动生化仪,酶动力学法检测。

2.2.3  统计学处理应用统计软件spss11.5进行数据统计,所得每组数据值用±s表示,统计学采用t检验,以p<0.05为具有统计学意义。

  3  结果

3.1  肿瘤接种成活情况整个实验中,肿瘤接种成活率100%。接种后第10天开腹见肝脏肿块呈圆形或椭圆形,表面灰白色,尚未见腹水。在进行肝动脉插管过程中,先后死亡十余只大鼠,均为分离血管时插管时动脉断裂失血所致。肿瘤移植后第10天,观察接种肿瘤处,见有白色疤痕,局部肝组织隆起。有的肿块外生生长,呈灰白色,有的肿块与腹壁粘连,故无法测量肿瘤的实际大小。

3.2  各组大鼠治疗前后的一般情况、体重变化及治疗前后体重差比较见表1。造模前大鼠神态安逸,行动敏捷,被毛光泽,食量较大且稳定,体重增长迅速;而造模后大鼠则逐渐出现精神萎靡,懒于行动,被毛失泽,食量减少,体重增长缓慢。治疗后天冬胶组和天冬胶加5-fu组大鼠的体重变化最小,其一般情况也较好,食量、进水量及活动尚可,精神较好,无耸毛等情况;而5-fu组大鼠体重最下降明显,并出现消瘦、耸毛、精神萎靡、活动少、食量、进水量减少等情况。表1  各组大鼠治疗前后体质量变化比较(略)

3.3  各组大鼠治疗前后血常规及肝肾功能的比较见表2~4。

4  讨论

tace的作用机制在于,肝癌的血供90%左右来于肝动脉,而正常肝组织肝动脉血供仅占25%,因此,栓塞肝动脉可导致肿瘤组织因缺血而大量坏死,对正常肝组织则损伤较轻。大多数研究表明,tace在引起肝癌大面积坏死,使肿瘤体积缩小方面的疗效已经得到充分肯定[1]。但是,tace也有着不可避免的负面影响,如可以导致肝脏功能的损害[2],肝硬变程度加重或以前没有肝硬变而出现肝硬变[3],抑制机体免疫功能,针对tace的不利影响研究合理的治疗模式是必要的。表2  各组大鼠治疗前后血常规的比较(略)

本次实验结果显示,各组大鼠治疗前体重比较无显著性差异(p>0.05),治疗后体重均较治疗前有所下降,这可能与手术创伤有关。治疗后天冬胶组和天冬胶加5-fu组大鼠的体重变化最小,其一般情况也较好,而5-fu组大鼠体重最下降明显,一般情况较差;碘油组和生理盐水组界于两组之间。治疗2 d后天冬胶组体重下降幅度显著小于5-fu组,比较其体重变化有统计学差异(p<0.05),治疗7 d后天冬胶加5-fu组体重下降幅度亦显著小于5-fu组(p<0.05);其他各组比较均有体重下降改变,但没有统计学差异(p>0.05)。治疗前各组大鼠之间在白细胞(wbc)、红细胞(rbc)和血红蛋白(hgb)方面比较均无显著性差异(p>0.05)。但各组治疗前后自身比较则提示5-fu组wbc下降显著(p<0.05,0.01),其余各组wbc也有一定的下降,但是无统计学意义(p>0.05)。第2天时天冬胶加5-fu组与生理盐水组治疗后比较rbc和hgb下降显著(p<0.05)。治疗前各组大鼠肝肾功能无显著差异(p>0.05),治疗后5-fu组alt、ast等指标有所增高,天冬胶加5-fu组在第2天时治疗前后的alt下降显著(p<0.01),与其他组间比较无明显差异(p>0.05)。碘油组在2天时治疗前后的alkp 增长显著(p<0.05),其他治疗前后及组间比较无明显差异(p>0.05)。治疗后各组大鼠肾功能无显著差异(p>0.05)。

尽管经肝动脉灌注给药,由于药物的首过效应使靶器官内药物量的摄取多,而流经身体其他部位的药量少,从而使全身的毒副作用减轻。但本实验结果表明化疗药物5-fu经肝动脉灌注仍然对动物机体有一定的毒副作用,而中药天冬胶则无明显影响。天冬胶在改善大鼠的生存质量方面优于5-fu,5-fu组大鼠的生存质量甚至不如生理盐水组和单纯的碘油栓塞组。中药天冬胶和5-fu合用能够降低化疗药物的毒副作用,改善大鼠的生存质量,这对如肝癌这样恶性程度高、进展快的肿瘤来说显得尤为重要。李永健等[4]通过采用统一辨证标准和资料处理方法的临床流行病学调研方案,对介入患者各证候进行统计,发现介入会伤阴、助热、生湿。介入组病人阴虚等证型明显增多,他们并认为“阴虚可能为肝癌所特有的,……要重视保护阴液。”而天冬正是滋阴佳品,作为栓塞剂可以直接保护被化疗药物损伤的肝阴,这也许是其与化疗药物合用后改善大鼠身体机能的原因之一。表3  各组大鼠治疗前后肝功能的比较(略)表4  各组大鼠治疗前后肾功能的比较(略)

上述研究表明,中药天冬胶副作用小于一般化疗药,天冬胶和化疗药联合使用降低了对正常肝组织的损害,减轻化疗药物的副作用,并有保肝功效,这是常用栓塞剂碘油所不具备的作用。天冬胶本品生物相容性好,可作为血管内注射剂使用[5]。开发利用天冬胶这类中药血管栓塞剂在治疗肿瘤中具有重要意义,这在国内外尚未见类似的研究报道。

【参考文献】

1]bruix j,liovet jm,castells a,et al.transarterial embolization versus symptomatic treatment in patients with advanced hepatocellular carcinoma:results of a randmized controlled trial in a single institution[j].hepatology.1998,27:1578.

[2]caturelli e, siena da, villani mr, et a1. transcatheter arterial chemoembolization for hepatocellular carcinoma in patients with cirrhosis: evaluation of damage to nontumorous liver tissue-long-term prospective study[j].radiology ,2000, 215(1): 123.

[3]陈晓明,罗鹏飞.肝癌经导管肝动脉化疗性栓塞存在的问题与对策[j].实用医学杂志,20xx,23(6):786.

[4]李永健,方肇勤,唐辰龙,等.介入与手术切除治疗后对原发性肝癌中医证的对比研究[j].中医药学刊,20xx,21(4):504.

[5]邢东炜,唐 岚,张闽光,等.天冬胶的溶血实验[j].时珍国医国药,20xx,16(11):1067.

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《气相色谱-质谱联用分析茵陈与牛至挥发油的化学成分_药学论文》

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