【知识百科】导语，你所阅读的本篇文章共有33085文字，由杨渊娟认真订正后，发布到范万文网！范万文小百科：西药，相对于祖国传统中药而言，指现代医学用的药物，一般用化学合成方法制成或从天然产物提制而成；包括阿司匹林、青霉素、止痛片等。西药即为有机化学药品，无机化学药品和生物制品。看其说明书则有化学名、结构式，剂量上比中药精确，通常以毫克计。中西药配伍的药理分析_药学论文感谢大家一起来看看，希望对你有帮助！
【关键词】 中药；西药；合理配伍；药理
为发挥中西医结合的优势,中西药配伍治疗常见病比较普遍,但合理伍用能使药物更好地发挥治疗作用,反之则不能获得预期的治疗效果,甚至产生不良反应。笔者现结合本院1 000例中西药配伍应用处方,浅析中西药配伍应用的有关问题。
1 一般资料
资料来源于本院门诊部中、西药配伍应用处方。
1000例处方分属以下3种：①首诊医生确诊一种疾病采用中西药配伍用药者423例；②以1种疾病先后到中西医就诊同时用药者328例；③2种以上疾病同时应用中西药治疗者249例。中西药伍用形式分3种：①中药汤剂与西药配伍347例；②中成药与西药配伍315例；③中西药注射剂分别或同时伍用338例。
2 随访结果
①中西药合用有协同、增效者508例；②中西药伍用降低不良反应者321例；③不合理伍用产生不良反应者171例。
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3.1 相互制约,减轻不良反应
临床应用的许多西药成分单一,其治疗作用虽然明显,但药物不良反应较大,用相应西药对抗或治疗效果不佳,实践证明配合有效中药可获得理想的效果。wWW.0519news.coM如多数抗肿瘤化学药物有严重的消化道反应及骨髓抑制引起白细胞减少等不良反应,将其配伍海螵蛸、白及、女贞子、石韦、补骨脂、山茱萸等可有效减轻化疗中的不良反应,特别是保护胃黏膜、防止白细胞数目下降,提高机体免疫力效果较好,其作用机理是海螵蛸所含大量硫酸钙和白及含的白及胶质等均有收敛、止血、制酸、消肿生肌等作用,对控制5-氟脲嘧啶等化疗等药物引起消化道反应有很好效果；女贞子、石韦、补骨脂、山茱萸分别含有女贞苷、黄酮苷及其他多种苷类等,与环磷酰胺等化疗药物伍用可防止骨髓抑制引起的白细胞数目下降。
当前用于抗精神失常的药物氯丙嗪有损害肝脏功能的不良反应,治疗疾病时如与珍珠层粉伍用,对肝功能受损者有较好改善作用,其作用机理是珍珠层粉含有20余种氨基酸及铜、铁、锌、镁等多种元素,有安神定惊、清热解毒的功能,两者合并应用,不但增加镇静效果,而且也利用了氨基酸保肝的作用。
链霉素在抗菌消炎治疗中应用较广,但其不良反应也较大,故临床用甘草与链霉素配伍使用,可以降低或消除链霉素的毒性[1]。通过这种方法,在原来因链霉素毒性作用而不能继续使用的患者中,有80%可以继续使用。
3.2 发挥协同作用,提高疗效
3.2.1 中药及其制剂与抗生素伍用效果较好
很多中草药如黄连、黄芩、黄柏、蒲公英、金银花、穿心莲等均有清热解毒、抑菌的作用,象黄连中的小檗碱、黄芩中的黄芩苷、金银花中的绿原酸、穿心莲中的穿心莲内酯均有抑菌成分,对痢疾杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、结核杆菌均有抑制作用。黄芩、金银花合用时,在抑制耐药菌体的蛋白质合成方面有协同作用,与青霉素配伍使用时能增强青霉素对耐药金黄色葡萄球菌的抑制作用。本组资料证明,多数急性上呼吸道感染病例,在应用抗生素的同时伍用上述中草药的患者痊愈状况比单纯应用抗生素者效果好,用药时间一般可缩短2～3 d。另外,板蓝根、大青叶、柴胡具有较强的抗病毒成分,在流行性感冒、肝炎高峰期治疗与西药配伍也收到很好的疗效。
3.2.2 中药及其制剂与治疗冠心病药物伍用可提高疗效
如三七、赤芍与乳酸心可定配伍应用可增加冠状动脉血流量,扩张血管降压,减轻心脏负荷,降低血脂等作用；生脉散、丹参注射液与东莨菪碱伍用治疗窦房结综合征既可提高心率,又可改善血液循环,缓解心肌缺血,从而达到标本兼治、相辅相成的功效。
3.3 中西药配伍禁忌
3.3.1 与降糖药类不能伍用的中药
甘草、鹿茸、麦冬、黄芩、川贝母等含有糖皮质激素样物质,其对糖代谢的作用与胰岛素相反,能促进糖元异生,升高血糖,故上述中西药伍用可使降糖作用减弱。
3.3.2 与铁剂不能伍用的中药
铁剂在酸性环境下易于吸收利用,延胡索含生物碱能抑制胃酸分泌,降低胃液的酸度,影响铁的吸收；杏仁、桃仁、乌梅等含杏仁苷和苦杏仁苷,可与铁剂作用生成亚铁氰化铁,从而影响铁剂的吸收利用。
3.3.3 与胃蛋白酶不能伍用的中药
胃蛋白酶需在酸性环境下才能发挥作用,延胡索、栀子、茯苓、桔梗、柴胡、甘草等能抑制胃酸分泌,降低胃液酸度,抑制胃蛋白酶活性；含碱性的中药,如硼砂、海螵蛸及成药行气散等能中和胃酸、使胃酸ph值上升,从而降低胃蛋白酶的疗效；白矾含硫酸铝钾,对酶有凝固作用,使酶失去活性,所以胃蛋白酶不能与之合用,以免降低或失去治疗作用,延误病情。
3.3.4 与胃复安不能伍用的中药
胃复安具有较强的拟胆碱作用,能显著加速胃排空,改善胃麻痹症状。含莨菪类生物碱的洋金花、莨菪、颠茄等能拮抗胆碱能神经,延缓胃排空；罂粟壳亦可延缓胃排空,它们在药理作用上与胃复安相互拮抗。
3.3.5 与氨基苷类、磺胺类、治疗溃疡病类药物不能伍用的中药
酸性(碱性)中成药不易与碱性(酸性)西药配伍,以免引起中和反应而降低药效[2],如山楂、五味子、乌梅、山茱萸及成药山楂丸、保和丸等含有丰富的维生素c、枸橼酸、苹果酸、酒石酸等有机酸[3],进入体内均使尿液酸度增加,如与磺胺药物同用,有机酸所致的酸性环境使乙酰化后的磺胺溶解度降低,易在肾小管中析出结晶,损伤肾小管及输尿管的上皮细胞,尤其是大量或长期同用易引起结晶尿、血尿、尿闭等；氨基糖苷类抗生素在碱性尿液中抗菌力强,如果同用上述酸性中药,使尿液ph值小于4时,则几乎无抗菌作用；治疗胃、十二指肠溃疡的药物多属碱性,如果同时服用上述含酸性成分的中药,因酸碱中和反应,易降低或丧失这类西药的药效。
3.3.6 与氨茶碱和降压药不能伍用的中药
氨茶碱对中枢神经有兴奋作用,麻黄的有效成分麻黄碱可增加氨茶碱的毒性,即小剂量麻黄碱可使氨茶碱毒性增加；另外,麻黄碱系拟肾上腺素药,能通过竞争抑制作用而减弱利血平、胍乙腚的降压作用。
3.3.7 与抗结核药不能合用的中药
利福平与地榆、虎杖等含有较多鞣质的中药及制剂合用时会妨碍利福平的吸收,降低血液浓度,影响疗效；异烟肼分子结构中有配位体,遇到钙、铁、镁、铝等金属离子易发生反应生成螯生物。因此,石膏、海螵蛸、牡蛎、磁石、自然铜、滑石、明矾等含有各种离子型中药及制剂不宜于异烟肼合用,以免影响药物吸收,降低疗效。
3.3.8 与红霉素不能合用的中药
红霉素易被胃酸破坏,莨菪碱类中药能抑制胃蠕动,延缓胃的排空,致使红霉素在胃内停留时间延长。生姜、鸡内金、大黄、肉桂、丁香、马钱子等能促进胃液及胃酸的分泌,同样使红霉素的破坏增大；巴豆、牵牛子、瓜蒌及何首乌等峻泻作用,加速肠蠕动,缩短红霉素在肠道的停留时间,影响吸收；地榆、虎杖、石榴皮、金钱草等含有较多的鞣质可与红霉素相结合,影响抗菌活力；炭剂中药亦在胃肠道中吸收红霉素,影响吸收,降低其生物利用度。
【参考文献】
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【摘要】 目的：了解基层医院工作人员职业暴露的构成比、危险因素(暴露原因),以探讨相关的防范措施。 方法：对20xx年6月～20xx年12月医院工作人员职业暴露的发生情况进行统计。 结果：共发生37例职业暴露，按工作类别分，前3位分别是护士、医疗废物处理人员、医生;按危险因素分, 前3位分别是利器损伤、皮肤黏膜暴露、手污染。 结论：针对职业暴露的危险因素，通过加强职业暴露防护知识的培训及提高自我保护意识、落实标准防护措施，可以达到减少职业暴露发生的目的。
【关键词】 职业暴露; 危险因素; 防范措施
随着社会人群乙肝的高发和结核病、艾滋病、梅毒等发病率的快速上升，医务人员正面临着极大的危险性，职业暴露问题越来越引起重视和关注。为了解我院工作人员职业暴露的发生情况，其危险因素，以便制订相应的防范措施，对我院20xx年6月～20xx年12月工作人员发生的职业暴露情况进行统计，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
对20xx年6月～20xx年12月我院职业暴露的发生情况进行统计，共发生职业暴露37例，按工作类别分前3位是护士、医疗废物处理人员、医生，按危险因素分前3位分别是利器损伤、皮肤黏膜暴露、手污染。发生的职业暴露个案经追踪均末发生感染，调查对象均为医院的工作人员。www.0519news.Com
1.2 方法
采用回顾性调查方法，根据职业暴露发生的个案记录，对不同工作类别人员职业暴露的构成比及导致发生性职业暴露的危险因素等状况进行了统计。
2 结果
2.1 不同工作类别人员职业暴露发生情况
在发生的37例职业暴露中，按工作类别分有护士、医疗废物处理人员(清洁工及医疗废物专职人员)、医生、检验人员、麻醉师，见表1。
2.2 导致发生职业暴露的危险因素
在发生的37例职业暴露中，按导致发生职业暴露的危险因素分，可分为利器损伤、皮肤黏膜暴露、手污染，空气污染、其它相关因素，见表2。
3 讨论
表1的统计结果表明,基层医院不同工作类别人员发生职业暴露最多的分别是护士、处理医疗废物人员、医生，医护人员发生率高是由于侵入性操作及接触利器的机会较多，而医疗废物处理人员由于每天都要接触感染性及损伤性医疗废物，所以也容易发生职业暴露。
表2的统计结果表明, 基层医院工作人员发生职业暴露的最危险因素是利器损伤、皮肤黏膜暴露、手污染。其深层的原因是因为基层医院工作人员缺乏职业暴露防护知识及自我保护意识、没有严格落实标准防护措施。表1 不同工作类别人员职业暴露的构成比(%)表2 导致发生职业暴露的危险因素构成比(%)
4 防范措施
4.1 加强职业暴露防护知识培训,提高防护意识
为了减少职业暴露的发生，除了提供必要的防护用品外，更重要的是加强防护培训，以提高自我防护意识。对于防护培训基层医院不够重视,工作人员对防护知识不熟悉，自我防护意识也不高,特别是职业暴露发生率最高的护士。有一些调查显示[1]，护理人员标准预防知识缺乏，对那些患者的血液、体液有传染性知晓率仅为36.2%，有37.9%的人不知道标准预防的隔离措施,而且防护意识淡薄，因此加强职业防护教育工作,是减低职业暴露发生的主要防范措施之一。
4.2 严格执行标准预防
标准预防[2]由美国cdc1995年提出,我国于1999年引入并在2000年编入颁布的《医院感染管理规范(试行)》 中。标准预防就是把所有患者的血液、体液等均具有传染性,不论其是否有明显的血迹污染或是否接触非完整性的皮肤与粘膜, 均需进行隔离，它是预防医院感染成功而有效的措施，更是预防职业暴露的有效措施。
4.2.1 医务人员在进行各项医疗操作时应严格遵守各项操作规程 在接触病人的血液、体液等及其污染物品，医务人员均应戴手套;对同一病人接触清洁与污染部位时应更换手套;当病人的血液、体液等有可能发生喷溅时应戴眼罩、口罩，并穿防护衣，以防止医务人员污染。被污染的医疗用品、仪器应及时处理，重复使用的医疗仪器在用于下一病人前应进行清洁和消毒。污染的床单要及时处理，对传染病病人应针对相应的隔离要求严格落实隔离措施。在戴手套前要检查有无破漏，在操作中要注意防止损坏。据报道[3]，英国一位护士被一名患艾滋病的非洲病人的含有新鲜动脉血的注射针头刺破皮肤，两周后，她的血样检查呈阳性。因此，工作中使用一些防护用具非常重要,国外有些医院已经提倡使用双层手套，这样有助于更有效地隔断肝炎病毒等感染。
4.2.2 利器损伤的防范措施[4] ① 医务人员执行注射、手术、传递锐利器械、侵入性等高危险技术操作时，应注意力集中;② 工作环境光线充足，区域宽敞;③ 物品摆放整齐、有序,锐器盒放置在离操作者最近的位置;④ 对不合作患者进行侵入性操作时，可多人协助，必要时做好约束工作;⑤ 充分暴露注射、手术部位;⑥ 选择使用安全的医疗护理用具;⑦ 操作过程中禁止用手直接接触针头等锐器，避免徒手将针头插入肝素帽、上手术刀片及将针头帽回套、徒手捡玻璃碎片等;⑧ 所有使用过的注射器、输液器针头及头皮针不作分离，直接放入利器盒;⑨ 设计更安全的工作工具及方法，如静脉采血使用真空试管并使用防护用具。
4.2.3 保持医院工作人员有良好免疫状态 由于医院工作人员经常处于接触各类感染性疾病的危险中，因此保持他们的良好免疫状态是感染管理的一个重要内容，在医务人员接触的感染中较为常见的是肝炎。据报道[3]，医院职工乙型肝炎的感染机会比一般人多得多，并被一些机构视为一种职业病予以考虑。一些研究表明，医院职工的乙型肝炎病毒阳性率比其它人群高2倍，而且随着在医院工作年限的延长而增加。对经常接触乙肝病人的工作人员应注射乙肝疫苗，合理使用免疫制剂，不仅能保护工作人员，而且也能使病人免受感染。
【参考文献】
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作者：杨俊宝,朱秀志,罗成科,李俊,魏会廷,彭正松
【摘要】 目的 半夏种质资源在分子水平上的遗传多样性。方法 应用随机扩增多态性dna技术(rapd)对21份半夏种质资源进行检测。结果 29个引物共得到162条扩增dn段,其中123条(75.9%)的片段具多态性,揭示了半夏居群间较丰富的遗传多样性。利用upgma法进行聚类表明,所有材料可划分为3类,根据rapd遗传相似系数划分的类群同地理分布有一定关系。结论 半夏种质资源在分子水平上确实存在较大遗传差异。rapd标记可作为构建半夏dna指纹图谱的有效工具。
【关键词】 半夏；随机扩增多态性dna技术；遗传多样性；dna指纹图谱
abstract：objective to discuss the genetic diversity of the germpla resources of pinellia ternata on molecular level. methods the genetic diversity of p. ternata 21 different populations were tested by rapd markers. results a total of 162 products were amplified by 29 10-mer arbitrary primers, 123 (75.9%) products were found to be polymorphic. the results revealed the abundant genetic diversity in p. ternata 21 different populations. the cluster ysis using upgma method showed that 21 populations were classified as 3 groups, and the genetic diversity in p. ternata based on rapd gs was correlated with geographic distribution. conclusion there actually existed much genetic diversity on molecular level among the germpla resources of p. ternata. rapd markers could be effective tools to construct dna fingerprintings of p. ternata.
key words：pinellia ternata；rapd；genetic diversity；dna fingerprintings
半夏[pinellia ternata (thunb.) breit.]是天南星科的多年生草本植物。wWW.0519news.CoM其块茎入药,具有燥湿化痰、降逆止呕、清痞散结的功效[1],为我国的传统中药。由于受环境条件的影响和人们对其需求量的增加,半夏野生资源已近枯竭,同时对不同产地的半夏遗传背景、彼此间的遗传关系尚不清楚。因此,有必要运用分子生物学方面的新技术手段加强其种质资源遗传多样性研究,并开展半夏野生种质资源的保护工作,从而为进一步选育优良种质提供理论指导和依据。
随机扩增多态性dna技术(random amplified polymorphi dna,rapd)是以pcr为基础的快速简便的分子标记技术,因其费用不高,dna用量少、不需预知研究对象的基因组序列、pcr引物无种属限制等优点,目前已应用于人参[2]、石斛[3]等药用植物的遗传多样性研究。本研究选取了21个野生半夏居群进行了rapd-pcr扩增,构建遗传聚类树状图对半夏居群间的遗传关系进行了研究,旨在探讨其居群间的遗传关系,为半夏种质资源的保护、合理开发利用和新品种选育提供有价值的资料,也为半夏药材dna指纹图谱的构建奠定一定的基础。
1 材料与方法
1.1 药材
采自四川、重庆及陕西等地不同地点,共21份。来源详见表1。
1.2 dna的提取
取每一居群10～15不同单株新鲜叶片约0.3 g,经消毒和洗净后,放在乳钵中加入600 μl氯仿于室温下研磨成匀浆,然后加入1.5 ml sds抽提液[100 mmol/l tris-hcl(ph 8.0)；100 mmol/l edta(ph 8.0)；0.5 mol/l nacl；1.5%(w/v) sds]混匀。将1.2 ml匀浆转移至1.5 ml离心管,室温(>15 ℃)静置10 min。室温下12 000 r/min离心10 min,取上层水相于另一干净1.5 ml离心管,加入等体积氯仿-异戊醇(24∶1)进行抽提,重复抽提2～3次,直到界面清晰为止。取上清液加入到500 μl预冷(4 ℃)无水乙醇中沉淀dna,此时可见絮状dna沉淀下来。去上清液,沉淀经70%乙醇洗涤3次,空气中干燥后用te溶解备用。用紫外分光光度计检测样品dna浓度,通过计算,稀释到终浓度为50 ng/μl备用。
1.3 rapd反应
用sangon公司生产的s系列的100个十聚体随机引物对材料进行扩增筛选,从筛选出谱带清晰的引物29个用于试验和统计,反应在bio-rad 的mycyclertm pcr仪上进行。反应总体积25 μl,内含1×pcr buffer,1.5 mmol/l mgcl2,1 u taq酶,0.25 μmol/l引物；100 ng模板dna,dntps各0.2 mmol/l。扩增前94 ℃预变性3 min,每循环在94 ℃变性1 min,36 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,共45个循环,完成最后一个循环后,在72 ℃保温10 min,然后在4 ℃保存。扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳分离。溴化乙锭染色,凝胶成像仪上观察照像、记录。
1.4 统计学方法
rapd扩增产物按条带有无分别赋值,有带记为1,无带记为0。利用软件popgene处理得到遗传相似系数(genetic similarities, gs)[4]。利用gs按不加权成对群算术平均法(unweighted pair group method with arithmetic average, upgma)进行聚类。统计在ntsys pc[5]软件系统下进行。 表1 供试的半夏来源（略）
2 结果与讨论
2.1 扩增片段多态性
rapd扩增结果表明：29个引物中有28个(96.6%)引物的扩增产物具多态性。图1为引物s20的扩增结果。29个引物共得到162条扩增dn段,平均每个引物可获得5.6个dn段, 其中123条具有多态性,占75.9%。表明半夏种质资源多态性水平较高,充分体现了半夏不同居群间的遗传多样性。
2.2 遗传相似系数
半夏21个不同居群的遗传相似系数值见表2。从中可见,半夏不同居群间的gs分布较广,范围为0.592 6～0.895 1,说明其遗传背景较复杂,表明其遗传多样性相对较丰富。pt0002居群的半夏与pt0009居群的半夏相似系数最大,高达0.895 1,说明它们的亲缘关系最近。另外,pt0002居群的半夏与pt0054居群的半夏相似系数最小,为0.592 6,说明它们的亲缘关系较远。表2 21个半夏居群遗传相似系数值（略）
2.3 供试材料的聚类结果
将21个居群材料rapd的扩增结果,利用popgene软件得到的遗传相似性系数数据,再利用nysys pc软件进行各品种间upgma聚类,构建聚类图(见图2)。
从聚类图可以看出,在遗传相似系数0.68处,所有材料可以划分成3组,即ⅰ组：居群pt0001,pt0037,pt0014,pt0026, ⅲ组：居群pt0030单独成组。其中,ⅰ组和ⅱ组又可分为亚组。材料pt0030为陕西省汉中居群,它与其它材料间的亲缘关系较远,故单独成组且在较小的相似性系数处与其它材料聚在一起。可以认为在很大程度上是由于受汉中当地生态环境条件的影响较大,基因型改变较大,因而在聚类图上单独成组。
图2还表明,不同产地的半夏在基因水平上已发生遗传变异,rapd技术能够从分子水平上刻划种内不同居群的遗传变异,这为半夏的药材道地性研究提供了分子水平的支持依据,为揭示道地药材的生物学本质提供了一些线索。
2.4 rapd聚类结果与地理分布的关系
根据rapd遗传相似系数聚成的3类,其地理分布情况。可见由21份材料聚成的3大类主要分布在：ⅰ组主要为四川盆地边缘重庆市东北至西南方向一线,主要地形为盆周山区,类型变化较小,只有理县(pt0054)居群远离此分布区。ⅱ组主要为四川盆地中部的平原及四周丘陵和低山地区,类型变化较丰富,有陕西临潼(pt0041)居群和梁平(pt0031),居群则稍偏离此分布区,而江苏徐州(pt0047)居群也归在此区。ⅲ组为汉中居群,单独为一类群,在地理位置上汉中位于秦岭山脉与大巴山脉之间。说明半夏根据rapd标记划分的类群同地理分布有一定的关系,也说明半夏居群的地理分布支持了其内部基因出现差异的可能性。
利用随机引物对不同物种基因组dna进行扩增,其多态性表现不同,如野山参为67.6%[2],石斛多态性为91.2%[3]。本研究结果表明半夏种质资源间多态性为75.9%,推测半夏种质资源基因组dna多态性较高的原因,主要是由于半夏长期生长在不同地理区域,在逐渐适应各自所处环境过程中遗传物质发生了变化,从而形成各具不同遗传特点的类型, 同时也阐明了中国半夏种质资源在分子水平上确实存在遗传差异。总之,不仅半夏不同居群之间具有较丰富的遗传多样性,而且半夏种质资源的各种各样的变异还与地理上的分布呈一定的相关性。由于半夏繁殖主要为无性繁殖,外界环境条件对半夏资源的基因组成和遗传变异影响较大。本研究同时表明,rapd技术可以作为半夏的品种选育中鉴别和选择亲本的辅助工具,也为半夏类药材的分类鉴定与道地性评价提供了可能的新手段。
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作者：严云良 吕佩惠 余陈欢
【摘要】 目的： 确定小鱼仙草总黄酮的最佳提取工艺条件。方法： 以乙醇回流提取法提取小鱼仙草总黄酮，采用分光光度法测定总黄酮的含量，以总黄酮提取得率为考察指标，考察溶媒倍数、提取时间和提取次数等因素对小鱼仙草总黄酮提取得率的影响，利用响应面法优化提取工艺，确定总黄酮的最佳提取工艺。结果： 小鱼仙草总黄酮的最佳提取工艺为：加药材20倍量浓度为 70%乙醇，于 90℃水浴回流提取 3次，每次 1.9 h。此工艺下小鱼仙草总黄酮的提取得率达8.50%。结论： 该工艺提取得率高、操作简便，易于工业化大生产。
【关键词】 小鱼仙草; 黄酮; 响应面法
小鱼仙草为唇形科石荠苧属一年生草本植物mosla dianthera的全草，别名疏花荠苧、野香薷等。具有祛风发表、利湿止痒之功效，主治感冒发热、扁桃体炎、中暑头痛、溃疡病等[1]。有关小鱼仙草挥发油的研究报道较多，其挥发油主要含有香荆芥酚、百里香酚、芳香醇和丁香烯等成分，具有较好的抑菌作用[2];而对小鱼仙草非挥发性部位的研究报道较少。现代研究表明，其非挥发性部位主要含有黄酮、酚酸等成分，具有抗菌、抗氧化、抗变态反应等作用[3，4]。wwW.0519news.CoM目前关于小鱼仙草总黄酮提取工艺优化方面的研究少见报道。仅刘小芬等[5]对小鱼仙草总黄酮的提取工艺作了单因素考察，缺乏多因素间的交互作用，具有一定的局限性。而响应面法(response surface ysis methodology，r)是目前比较通用的设计方法，它通过多元二次回归方程拟合多因子实验中多个因子与响应值间的关系，通过对方程求极值的方法达到参数优化的目的[6～9]。本研究在前期单因素实验的基础上，采用响应面法，根据boxbehnken组合设计原理，考察了影响小鱼仙草总黄酮回流提取效果的主要因素，确定了其最佳提取工艺条件，为更好地开发以小鱼仙草总黄酮为主的药物及其制剂提供了实验参考。
1 仪器与试药
wnd200a型高速中药粉碎机(上海微型电机厂)、s22pc可见分光光度计(上海棱光技术有限公司)。小鱼仙草药材于20xx年10月采自浙江永康，经俞冰副教授鉴定为小鱼仙草mosla dianthera maxim.的地上部分，阴干，粉碎，备用。芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所(批号：10008020xx0)，所用试剂均为纯。
2 实验方法与结果
2.1 总黄酮的含量测定
精密称取105℃干燥恒重的芦丁对照品10.6 mg，加50 %乙醇溶解定容于50 ml容量瓶，得浓度为2.12 mgoml-1标准品溶液。精密吸取标准品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml，分别置25 ml容量瓶中，加5 % nano2 1.0 ml，摇匀，放置6 min后加10 % al(no3) 3 1.0 ml，摇匀，放置6 min后再加10 % naoh 10 ml，加50 %乙醇稀释至25 ml，混匀，静置15 min，同行试剂作空白，于510 nm处测定吸光度[10]，以吸光度值为纵坐标，以芦丁浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：a= 0.5464c + 0.0056 ，r = 0.9997，结果表明芦丁在0.212～1.272 mg范围内线性关系良好。
2.2 提取工艺研究
根据boxbenhnken的中心组合实验设计原理，综合单因素实验结果，在选定乙醇浓度为70%、提取温度为90℃的前提下，选择溶媒倍数、提取时间和提取次数3个因素作为自变量设计响应面实验，分别以x1、x2、x3表示，每个自变量的低、中、高水平分别以-1、0、1进行编码，以小鱼仙草总黄酮提取得率作为响应值y。实验因素及水平安排见表1。表1 实验因素及水平安排表
分别精确称取小鱼仙草干燥药材粉末 5.0 g，根据表1选择的因素和水平，70% 乙醇回流提取，过滤，加同浓度的乙醇溶液定容至250 ml，摇匀，作为供试品溶液。精密移取0.3 ml供试品溶液，测定总黄酮含量，计算总黄酮提取得率，结果见表2。表2 响应面实验安排及结果(n=3)注：共有15个实验，其中12个为析因实验，3个为中心实验以估计误差。
采用sas 9.1.3软件对表2结果进行响应面回归，得拟合方程：y=8.436667+0.11x1 +0.2x2 +0.2425x3-0.107083x12+0.1775x1x2 +0.0625x1x3 -0.077083x22 +0.1575x2x3-0.172083x32(r= 0.9622)。并作回归方程显著性检验及方差，结果见表3。表3 回归方程的显著性检验及方差结果.
由表3可知，回归方程具有显著性，且线性相关系数r在置信区间95%，说明该模型与实际实验拟合较好。可用于替代实验点对实验结果进行。方程中一次项对小鱼仙草总黄酮提取得率有显著性影响，二次项、交互项则无显著性影响，因此各因素与指标之间是简单的线性关系，而不是二次关系。其中，提取时间(x2)和提取次数(x3)对总黄酮提取得率有显著性影响，而溶媒倍数(x1)则无显著性影响。并作相应的等值线图和响应图，结果见图1～6。
经sas软件计算后可知，理论最佳回流提取工艺为：加药材 24.30倍量的浓度为 70%乙醇于 90℃水浴回流提取 2.54次，1.85 h。在此条件下，小鱼仙草总黄酮提取得率理论值为 8.78%。综合考虑实际操作的简便及实验方差结果，确定最佳回流提取工艺为：加药材20倍量浓度为70%乙醇，于 90℃水浴回流提取 3次，每次 1.9 h。按最佳提取工艺进行验证性实验，测定小鱼仙草总黄酮含量，计算提取得率，结果总黄酮的提取得率为8.54%，rsd= 0.47%，证明该工艺稳定，重现性好。
3 结论与讨论
数理统计方法在中药有效成分的提取工艺中应用广泛，通常采用正交设计法，但该法仅对实验所选取的因素水平进行优化选择，不能在给出的整个区域上找到考察因素的最佳细化值。而响应面法作为一种新的统计方法，可通过中心组合实验，研究多种因素间的交互作用，并能从图形方面寻求最佳的实验考察因素细化值[11]。因此，本实验采用响应面法进行小鱼仙草总黄酮提取工艺的研究。结果实验所确定的提取工艺具有提取得率高、操作简便且成本较低等特点，为小鱼仙草总黄酮生产工艺的优化及开发小鱼仙草植物资源提供实验依据。
通常认为，提取溶剂越多，被浸提出来的物质就越多[12]。本实验曾对溶媒倍数进行单因素考察，结果表明，30倍量时提取得率最高，再增加溶媒倍数时反而下降。究其原因可能是溶媒倍数增加至一定值后，乙醇与药材形成竞争体系，导致药材对热能吸收减少，细胞破裂不完全，黄酮不能充分溶出[13]。同时，提取溶剂用量过大，会给过滤及蒸发浓缩工序增加困难，并且增加生产成本。故最终确定溶媒倍数以20～40倍量作为考察水平。
本实验曾考察了提取溶剂、提取温度等单因素对提取工艺的影响。据文献报道，当乙醇浓度在60～80%时，药材有效成分可最大溶出[14]，本实验结果也证明，当乙醇浓度达到70%时，小鱼仙草总黄酮提取得率最高;另一方面，随着提取温度的提高，热力学运动加快，有利于药材有效物质的溶出，但当温度接近沸点时，黄酮苷类成分的苷键易水解开裂，造成了化学成分的改变[15]。实验研究表明，当提取温度为90℃时总黄酮提取得率最高，因此实验最终确定以70%乙醇作为提取溶剂，提取温度以90℃为佳。
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作者：谢琪,范为宇,赵英凯,徐俊,胡艳敏,何巍
【关键词】 传统医学；世界；立法；现状
20xx年6月12－14日,世界卫生组织(who)在瑞士日内瓦召开了“传统医学纳入国家医疗保健体系工作组会议”。会议回顾了传统医学或补充与替代医学融入国家医疗保健体系的现状,分享了各国在这方面的经验和信息,讨论将传统医学或补充与替代医学纳入国家医疗保健体系的定义和标准,以及需要采取的关键步骤。共汇集此次会议幻灯片资料19份、调查问卷16份,涉及日本、韩国、泰国、越南、不丹、中国香港特别行政区、伯联合酋长国、伊朗、沙特伯、美国、加拿大、巴西、智利、澳大利亚、英国、挪威、瑞典、加纳、马里及非洲地区等18个国家和地区,全面翻译和梳理后,笔者对这些国家和地区的传统医学/补充与替代医学资料进行了汇总。
1 立法现状
1.1 医疗立法 1.1.1 草药疗法 10个国家/地区有草药相关立法或制定了管理条例,分别为：加拿大、伯联合酋长国、澳大利亚、瑞典、泰国、马里、日本、韩国、巴西、中国香港特别行政区。wWW.0519news.CoM加拿大联邦20xx年公布了有关天然健康产品的联邦法规,传统医学/补充与替代医学医疗保健的法规由各省制订。美国食品药品管理局(fda)制定了草药产品法规。马里1994年制定了《传统医学法规》,1995年制定了关于传统医学机构团体及其功能的规定,20xx年成立了马里传统医学治疗师及草药医师联盟,并据此做出相关规定。韩国1951年制定了《医疗服务条例》,传统韩医师享有执业资格。
1.1.2 针灸疗法
7个国家/地区有针灸相关立法,分别为：泰国、伯联合酋长国、澳大利亚、沙特伯、日本、韩国、中国香港特别行政区。泰国1999年制定了《治疗的技术实践法案》,中医是唯一被泰国认可的补充与替代医学,而针灸是其中一项。另外,美国fda制定了针具(设备)法规；加拿大针灸在3个省是合法的；加纳虽然没有针灸立法,但采用who相关指南。
1.1.3 顺势疗法
伯联合酋长国和澳大利亚有顺势疗法相关立法； 美国fda制定了顺势医学法规；巴西20xx年公布了有关结合与补充医学的政策,顺势疗法、针灸均作为专科发展,并制定了有关管理条例。
1.1.4 整脊疗法
8个国家/地区有整脊疗法相关立法,分别为：美国、加拿大、伯联合酋长国、澳大利亚、瑞典、沙特伯、日本、中国香港特别行政区。美国主要通过整脊师执业资格制度管理。加拿大整脊疗法在所有省均获得了合法的地位,每个省都有相关法规。加纳采用who相关指南。
另外,智利20xx年6月制定了《实施替代医学技术条例》。美国由宗教团体组织对精神心灵疗法做出相关的管理。巴西将顺势疗法、针灸列为专科,明确表示准备成立国家级的传统或补充与替代医学专家委员会进行管理。挪威20xx年12月颁布了《替代疗法营销条例》。
1.2 植物药立法
15个国家/地区对植物药实行国家/地区立法或制定了管理条例,分别为：伯联合酋长国、加纳、澳大利亚、瑞典、美国、泰国、不丹、马里、加拿大、伊朗、日本、韩国、巴西、中国香港特别行政区、沙特伯。加纳1992年制定了《食品药品法》,其中包括有植物药的管理规定。澳大利亚1989年制定了《医疗用品法案》,1990年制定了《医疗用品管理条例》,不同州及地区均对药品及毒药立法严格管理植物药。瑞典1993年制定了有关管理条例。美国fda根据其权利要求分别制定药品管理条例或膳食补充剂管理条例。泰国1967年制定了《药物法案》。不丹1996年制定了《传统医药使用指南》,传统药物尤指植物、矿物及动物药。马里1920年出版第1部《药用处方集(dominique traoré)》,1981年成立了马里药业办公室。日本1960年制定了《药事法》,分处方药、非处方药、准药物对药物进行管理,处方药中包含了传统药物。韩国1953年制定了《药事条例》,1994年建立了韩药剂师许可体系。沙特伯1991年制定了对于草药、健康食品产品的管理条例。加拿大联邦20xx年1月公布了有关天然健康产品的联邦法规。伊朗1988年以来,国家法律直接提及传统医学,建立健康与医疗负责传统医学的研究、教育和医疗,相继启动了若干项目开发草药与植物药制剂,1981年开展了草药及植物药制剂的生产加工,1996年伊朗健康与医疗成立了药用植物与其产品的专业委员会,制定了伊朗国家的相关产品政策,引导、发展药用植物与草药,1996年由国家专业委员会制定了关于草药产品注册管理政策的文件。
1.3 国家/地区政策
9个国家/地区制定了有关传统医学/补充与替代医学的国家/地区政策,分别为：马里、中国香港特别行政区、巴西、越南、韩国、加纳、澳大利亚、不丹、泰国。加纳1992年制定了《食品药品法》,20xx年8月修订了《国家药品政策》,制定了《国家生物安全管理条例》,强调传统医学的研究和发展以及合理使用。澳大利亚医疗用品管理局20xx年8月制定《澳大利亚补充医学管理指南》,20xx年发布《澳大利亚对补充医学专家委员会建议的响应》。不丹20xx年制定了有关国家/地区政策,旨在促进并保持国家/地区特有的“gso-ba- rig-pa”卫生体系。泰国在第四次国家/地区经济和社会发展计划(1977－1981年)开始实施关于促进药用植物和草药在初级卫生保健中应用的政策,1993年发布了《泰国传统医学国家/地区政策和规划》,正式在医疗服务部中建立泰国传统医学研究所,20xx年将该研究所归入泰国传统与替代医学发展部(dtam),同年,国家/地区补充与替代医学政策发布,并在dtam中建立了补充与替代医学部门。马里20xx年制定了国家传统医学政策。另外,中国香港特别行政区(1997年)、巴西(20xx年)分别制定了传统医学发展政策,越南制定了《20xx－20xx年传统医学发展战略》,总目标是“继承、保护和发扬传统医学,使之与现代医学结合,营造一个现代的、科学的、国际的和大众的越南医药学”。
1.4 管理部门
12个国家/地区的中设有传统医学/补充与替代医学管理部门,这些国家和地区分别为：伯联合酋长国、加纳、澳大利亚、泰国、不丹、马里、加拿大、日本、韩国、越南、中国香港特别行政区、沙特伯。加纳1991年建立了传统替代医学理事会。澳大利亚1999年建立了“澳大利亚卫生保健部-医疗用品管理局-补充医学办公室”。泰国20xx年10月依照《体制改革法案(第43条)》成立了传统与替代医学发展部,下设泰国传统医学研究所、补充与替代医学部、东南亚泰-中传统医学研究所、本土医学研究组和秘书处。不丹1967年在医疗服务部下设传统医学服务研究所。韩国1993年成立了传统医药政策办公室。马里1986年在马里邦贾加拉成立传统医学地区中心,1973年成立了国家药典及传统医学研究所。伯联合酋长国20xx年、加拿大1999年、日本1995年、中国香港特别行政区1997年、沙特伯1995年在各自卫生管理部门中设立了传统医学/补充与替代医学部门。
1.5 有关传统医学/补充与替代医学人员管理的立法或管理条例
1.5.1 草药相关人员
7个国家/地区制定有相关立法或管理条例,分别为：伯联合酋长国、加纳、泰国、马里、日本、韩国、中国香港特别行政区。美国很少有州对草药师发放执业资格证书,目前正在申报《医疗过失条例》。澳大利亚的维多利亚州有关中草药人员管理法律法规,新南威尔士州及西澳州提议立法。
1.5.2 针灸相关人员
8个国家/地区制定了相关立法或管理条例,分别为：泰国、伯联合酋长国、加纳、沙特伯、日本、韩国、巴西、中国香港特别行政区。泰国只有通过正式针灸课程培训的有执照的中医医生或西医医生才能从业。澳大利亚维多利亚州制定了有关针灸师的法律法规；新南威尔士州及西澳州提议立法。美国大多数州制定了有关执业针灸师的法规,并正在申报《医疗过失条例》。加拿大个别省制定有执业针灸师相关法规。
1.5.3 顺势疗法相关人员
伯联合酋长国、加纳、巴西3个国家制定了有关法规,美国有几个州制定了顺势疗法医师执业管理法规,并正在申报《医疗过失条例》。
1.5.4 整脊疗法相关人员
7个国家/地区制定了有关法规,分别为：加拿大、澳大利亚、伯联合酋长国、加纳、沙特伯、日本、中国香港特别行政区。加拿大每个省、澳大利亚所有各州都有相关法规。美国各州均已对整脊师制定了执业法规,并正在申报相关的《医疗过失条例》。
1.5.5 精神心灵疗法相关人员
加纳的《新精神卫生法》有相关条例。美国精神心灵疗法通常由宗教团体组织进行一定的管理。挪威20xx年6月颁布了《补充与替代医学新法规》,与替代医学疗法有关,20xx年12月颁布了《有关从业人员自愿登记注册机制的条例》。不丹由药品管理部门和医疗卫生委员会负责医药及不同疗法的相关法律及法规,制定有各种疗法指南,以保证在医疗实践中的统一性。
1.6 发展计划
8个国家/地区有传统医学/补充与替代医学的计划,分别为：马里、加纳、巴西、澳大利亚、韩国、伊朗、泰国、不丹。加纳制定有20xx－20xx年国家卫生政策,以“健康创造财富：加纳发展新模式”为主题,重点为卫生、营养、安全水源供应；促进传统医学在保健中的作用；加强突发事件医疗服务及专家医疗服务；制定国家卫生保险制度,提高国家食品及教育缺乏地区的基本医疗保健水平；研究并开发本土药品,与民间组织合作,发展合作伙伴。韩国制定有《韩医药全面发展综合计划(20xx－20xx)》。不丹1998年制定的国家计划包括：提供传统医学服务、发展人力资源、开发传统医药产品。马里20xx年、巴西20xx年、泰国1993年各自制定有有关传统医学/补充与替代医学的计划。
2 讨论
近几十年来,传统医学迅速传播,并在发展中国家得到广泛应用,传统医学或补充与替代医学正在逐步或已经被纳入各国国家医疗保健体系。在这一进程中,各国在立法、医疗管理、教育培训、科研及产品生产和管理方面面临着各种具有共性或特性的问题,同时也正在采取相应的对策。虽然越来越多的国家逐步加强了对于传统医学的规范化与法制化管理,但缺乏相应的法制管理仍是目前传统医学发展所面临的重要挑战,世界范围内的传统医学管理工作仍有待加强,使传统医学能够为保障人类健康更好地发挥作用。加强与各国就传统医学立法和管理进行交流,可以了解和掌握各国对传统医学的管理规定,从而在我国与之交流时能够采取主动,其他国家在传统医学立法管理方面的经验教训也可引为借鉴,促进我国中医药工作的发展。如泰国将传统保健、草药蒸汽浴等保健方法作为向民众普遍提供的医疗卫生服务项目进行管理,较之多数国家医疗卫生服务管理限于传统药物疗法、针灸疗法等内容,对传统医药医疗卫生服务模式、管理范畴等提出了新的议题。
另一方面,国际传统医学或补充与替代医学的迅速发展势头,势必对我国的中医药工作带来一定的影响,特别是中医药国际交往不断增多,各国将在传统医药医疗、教育、科研等方面进一步寻求与我国的合作,在市场开发及研究成果的产品转化方面将与我国开展竞争。如何加强与各国传统医学交流的同时,保护我国的中医药资源、维护我国的中医药知识产权、保证我国在传统医学领域中的主导地位等方面还需要针对新形势,认真研究相应的对策,做出不懈的努力。
本研究工作的基础资料来自who的国际会议,共有35个国家/地区参会,会议代表均来自各国家/地区传统医药或卫生主管部门,资料时效性、真实性强,在一定程度上反映了当前传统医学被各国接受的程度。限于此次会议资料涉及的国家和地区广度,调查问卷设计深度所限,尚不能完整地反映出传统医学在世界各国发展的全貌。如果能够继续采用这一研究模式,持续深入地开展全球性区域研究,建立动态的研究模式与研究平台,将会更好地为我国中医药相关工作提供动态参考,为中医药国际化合作奠定良好的基础。
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